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新品上市|新一代高性能培养基 HEK293 MaxX正式发布
2022-04-09

新品上市|新一代高性能培养基 HEK293 MaxX正式发布(图1)

HEK293细胞(人胚胎肾细胞293)由于易体外培养、易转染等特点,常被用于瞬时转染快速获得大量的目的蛋白或病毒载体类药物。相比于稳定转染,瞬时转染具有周期短,工艺简单等优点。但难以获得高浓度的蛋白或高滴度的病毒类产品一直是急需解决的问题。与稳定转染表达目的产物不同的是,选择合适的培养基是提高瞬转产率最有效的手段。


新品上市|新一代高性能培养基 HEK293 MaxX正式发布(图2)

HEK293 MaxX是9499www威尼斯最新推出的一款高性能、化学成分限定的HEK293细胞瞬时转染培养基。本文对HEK293 MaxX在不同HEK293细胞株及不同目的产物瞬时表达应用上的表现做了系统研究。


实验材料及方法

表1 实验材料

新品上市|新一代高性能培养基 HEK293 MaxX正式发布(图3)


转染前将Expi HEK293细胞在基础培养基HEK293 MaxX进行传代适应性培养,传代时间不少于3个代次。待细胞完全适应基础培养基HEK293 MaxX后,转染前一天将细胞按1.5×106 cells/ml的密度27ml体积接种于125ml摇瓶中,转染当天密度为3-4×106 cells/ml。30ug质粒DNA(重链:轻链=1:1)用含有4mg/L Insulin的HEK293 MaxA稀释至1.5ml,90ug的PEI(40KDa)也用含有4mg/L Insulin的HEK293 MaxA稀释至1.5ml。


将稀释好的质粒DNA和PEI 轻柔混合,室温静置孵育10min后,加入Expi HEK293细胞悬液中正常培养,记为D0。转染后18-24h添加培养体积10%的MaxFA6和1%的FB补料培养基,正常培养7天,其中D1、D3、D7取样,测定细胞的密度、活率、残糖含量、乳酸含量等培养参数,D5、D7的样品采用HPLC方法测定抗体产量。分别比较了HEK293 MaxX与HEK293 MaxD(之前在大量项目已被证明与HEK293常用进口培养基表现相当)在同一细胞株不同项目(图1)、同一项目不同细胞株(图2)上的表现。也直接将HEK293 MaxX与某进口、国产同类HEK293瞬转培养基产品表现进行了直接对比(图3)。


新品上市|新一代高性能培养基 HEK293 MaxX正式发布(图4)

图1 同一HEK293细胞株不同项目在HEK293 MaxD和HEK293 MaxX中的生长及表达


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图2 不同细胞株在HEK293 MaxD与HEK293 MaxX中生长及表达


新品上市|新一代高性能培养基 HEK293 MaxX正式发布(图6)

图3 HEK293 MaxX培养基与国内外同类产品的表达产量比较

实验结论

HEK293 MaxX是一款高性能HEK293瞬转培养基,具有非常好的通用性,可广泛用于HEK293细胞瞬时转染表达目的产物。同时,相比于目前市面上已有HEK293瞬转培养基,HEK293 MaxX在产量提升方面具有更优异的表现,提升幅度都在23%以上,最高达51%


订购信息

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免费试用申请


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